SBI发布一款新型核酸转染试剂Exo-Fect，可以将核酸直接转染至分离得到的exosome中。转染的si/miRNA,、mRNA，甚至质粒DNA，可通过转染的exosome进入靶细胞。
只需要将目的核酸与Exo-Fect转染试剂、分离到的exosome简单混合，就能形成exosome核酸运载复合体。整个转染过程简单，不到1小时即可完成核酸高效转染入exosome过程！
△产品及包装信息：
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Catalog |
Product |
Size |
Exo-Fect Reagent |
Positive Control siRNA (TX-Red) |
ExoQuick-TC |
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EXFT10A-1 |
Exo-Fect Exosome Transfection Kit |
10 rxns |
100 ul |
200 ul |
500 ul |
3174.00 |
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EXFT20A-1 |
Exo-Fect Exosome Transfection Kit |
20 rxns |
200 ul |
400 ul |
1000 ul |
5698.00 |
△使用方法：
Exosome样本准备
从血清或培养基上清中分离exosome（使用SBI ExoQuick, ExoQuick-TC或者超速离心法），500 ul无菌1x PBS重悬exosome沉淀。建议单个反应exosome蛋白总量为50 - 300 ug（约1x10^6 exosomes）。
Exosome转染实验
1. 准备接近的1.5ml EP管，如下混合:
10 ul Exo-Fect solution
+ 20 ul 核酸 (20 pmol si/miRNA, 1 ug mRNA 或 5 ug plasmid DNA)
70 ul 无菌 1x PBS
50 ul 无菌1x PBS重悬好的exosome
= 150 ul 转染反应体系
2. 轻弹或颠倒EP管3次以混匀反应体系，
不可涡旋。
3. 将EP管置于37℃混合器孵育10min后，立即置于冰上。
4. 终止反应：在转染反应体系中加入试剂盒提供的ExoQuick-TC 30 ul，上下颠倒6次以混匀，，
不可涡旋。
5. 将EP管置于冰上（或4℃）孵育30min。
6. 最高转速13,000-14,000 rpm离心3min。
7. 弃去上清，
300ul 1x PBS重悬转染好的exosome沉淀。
8. 转染好的exosome可用于添加入靶细胞，或者其他体内试验。
将Exo-Fect转染的exosome加入靶细胞
1. 6孔板每孔使用去exosme的FBS培养约为1x10^5个细胞，添加至少150 ul 转染好的exosome。可根据实验需求调节添加比例。
2. 继续细胞培养2-24小时，根据使用的荧光染料及荧光显微镜操作说明，在荧光显微镜下观察。阳性对照Texas Red-labeled siRNA，使用荧光显微镜上标准RFP滤镜设置可观察其通过exosome运输至靶细胞的过程。
△参考数据
Exo-Fect试剂盒可用于转染小RNAs (si/miRNAs)，较长的mRNAs，甚至质粒DNA至完整的exosome中！
将转染好的exosome处理靶细胞，24-48小时后拍照：
左图：Texred荧光标记的siRNA转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
中图：编码RFP的mRNA成功转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
右图：编码GFP的质粒DNA成功转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
